Elispot 世联博研 Elispot斑点分析系统

Elispot（ELISPOT）的原理是什么呢

（一）原理：细胞受到刺激后局部产生细胞因子，被PVDF膜上特异性单clone Antibody捕获。细胞分解后，再与生物素标记的二抗结合，Elispot分析仪，其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后，PVDF膜出现“紫色”的斑点为阳性反应。

（二）ELISPOT与ELISA的区别

1.ELISA通过显色反应，在Microplate reader上测定吸光度，与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。

2.ELISPOT通过显色反应，在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点，可直接在显微镜下或通过仪器对斑点进行计数，1个斑点代表1个细胞，从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。

3.由于是单细胞水平检测，ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏，能从20万～30万个细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。

4.捕获Antibody为高亲和力、高特异性和低内toxin McAb，在研究者以刺激剂activation细胞时，不会影响活化细胞分泌细胞因子。

ELISPOT图像分析仪

德国Bio-Sys Bioreader是一种用于ELISPOT图像分析仪的科研用仪器，它的出现解决了ELISPOT斑点计数的快速化，标准化和斑点信息的详细化，Elispot斑点分析系统，并且可以对细胞因ZI进行定量分析。

德国Bio-Sys GmbH公司介绍：

l 具有30多年的生物图像分析仪生产经验

l 十年的ELISPOT图像分析仪生产经验

l 在全世界广泛使用和认可

l 1997年推出第yi代Bioreader 1000型和2000型ELISPOT图像分析仪

l 2001年推出BioReader 3000型ELISPOT图像分析仪，获得应用于ELISPOT斑点识别的3D双光源专LI技术，首CI实现对ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好识别

l 2004年推出BioReader 4000型ELISPOT图像分析仪，第yi个采用改进机械结构的前置式载物台和自动开关密闭检测室，同一孔中同时识别多至三色ELISPOT斑点

l 2004年底推出BioReader 4000-F型荧光ELISPOT图像分析仪，Elispot酶联免疫斑点分析，首ci实现荧光ELISPOT检测

l 2007年推出Bioreader 5000型

l 2010年推出Bioreader 6000型

l 2019年推出Bioreader 7000型

欧盟科技项目：Eureka Project 2956（多种细胞因ZI分析仪）指ding仪器.

德国bioreader酶联斑点分析仪

●立体3D双光照明系统可实现更好的细胞因YI定量和簇分离，

●简洁强悍的界面友好型操作：类似Windows Office 软件界面，类似邮件文件夹操作；

●自动斑点大小识别技术（Auto-Size）：辅助真实斑点自动计数；

●自动边缘识别技术（Auto-Border）：尤其针对透明板、白色PVDF板，Elispot，可有效识别板孔边缘，确保识别全孔斑点；

局部斑点3D 放大技术；

斑点光密度值分析和3D 细胞因YI分泌峰技术，可形成斑点细胞因YI分泌量相对定量输出；

●亚像素（Sub-Pixel）技术：增强斑点图像识别清晰度；

融合斑点自动分离识别技术和纤维去除技术；

图像自动居中、自动暴光、自动白平衡、自动光照调节等

●三种人工质控方式：可指ding单独斑点，指ding区域，或指ding标准斑点人工干预计数标准；

具备双色ELISPOT 斑点分析功能；

无需染色即可计数细胞克long；

扫描和分析，可分离进行，也可以整合进行；